方法檢出限和定量限標(biāo)準(zhǔn)做法

發(fā)布日期：2019-07-14 12:51:51 來源：互聯(lián)網(wǎng)

    檢出限（LOD）或定量限（LOQ）的測定通常是在目標(biāo)物的含量在接近于“零的時候才需要進(jìn)行測定。當(dāng)方法應(yīng)用于所測定的分析物濃度要比定量限大的多時，檢出限與定量限評定就顯的不是非常有必要了。但是對于那些濃度接近于檢出限與定量限的痕量和超痕量測試，常報出“未檢出”時，這時檢出限或定量限對于風(fēng)險評估或法規(guī)決策則就顯得非常的重要。

    不同的基體需要獨(dú)立評估其檢出限和定量限。

    檢出限（LOD）

    對于大多數(shù)現(xiàn)代的分析方法檢出限（LOD）分為兩個部分，方法檢出限（MDL）和儀器檢出限（IDL）

方法檢出限是在應(yīng)用在某個具體基體內(nèi)的分析物的測定。方法檢出限可定義分析物質(zhì)能在可靠將分析物測定信號區(qū)別于特定基體背景（噪音）的最低濃度或量。換句話說，方法檢出限就是方法中測定出大于相關(guān)不確定度的最低量（Taylor，1989）。在分析方法檢出限（MDL）時需要靠考慮到所有基體的干擾。 

    方法的檢出限不應(yīng)與儀器最低響應(yīng)值相混淆。使用信噪比可作為考察儀器性能的一個有用的指標(biāo)，但不適用于評估方法檢出限。目前大多數(shù)的分析都是利用設(shè)備進(jìn)行分析，但每個設(shè)備對于所檢測的分析物的量都會有一定檢出能力。這種檢出能力可用儀器檢出限（IDL）進(jìn)行表示。儀器檢出限可定義為儀器能將目標(biāo)物與設(shè)備背景相區(qū)別或可靠檢測的最低量（儀器噪音）。隨著靈敏度增加，IDL降低，儀器噪音降低，IDL也降低。

    可用多種方法確定檢出限，羅列出應(yīng)用評定檢出限的一些方法。

    1 基于虛擬（visual）評估LOD

    Visual評估可應(yīng)用于非儀器方法和儀器分析方法，同時也可應(yīng)用于定性測試方法的評估。

    通過在樣品空白中添加已經(jīng)濃度的分析，后評定能夠可靠被檢測出的最低濃度值。

    在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物。在每一個濃度點(diǎn)需要進(jìn)行約7次的獨(dú)立測試。各個濃度點(diǎn)的重復(fù)性測試應(yīng)該隨機(jī)性。對于定性分析，通過繪制陽性百分比（陰性）與濃度之間的響應(yīng)曲線，檢查確定哪個濃度閾值是不可靠的。

    2 空白標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行評定LOD

    通過分析大量的空白進(jìn)行評定（推薦20個以上）。樣品空白獨(dú)立測試的次數(shù)（n大于10以上），以及加入最低可接受濃度的樣品空白測試次數(shù)（n大于10次以上）。LOD的可用樣品空白平均值值加上3被標(biāo)準(zhǔn)偏差。（0+3S）

    3 基于校準(zhǔn)曲線的LOD評定

    如果LOD數(shù)據(jù)或與LOD相近的數(shù)據(jù)無法得到，則可利用校準(zhǔn)曲線的參數(shù)進(jìn)行評估。用空白加上空白的3倍偏差，儀器對于空白的響應(yīng)可用方程截距a表示，儀器響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差可用校準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)偏差Sy/x來表示。故可利用方程yLOD=a+3sy/x=a+bxLOD,則xLOD=3sy/x/b.這個方程廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)。然而由于這是推斷，當(dāng)濃度接近于期望LOD時，則所測定的數(shù)據(jù)就會顯得不那么可靠，建議當(dāng)濃度接近于LOD時，需要證明要在合適的置信區(qū)間內(nèi)能夠被測定出來（可靠的被測定出來）。

    4 基于信噪比LOD

    由于儀器分析過程都會有背景噪音，常用的方法就是利用已經(jīng)低濃度的分析物與空白樣品的測量信號進(jìn)行比較，確定出能夠可靠測定出的最小的濃度，最典型的可接受的信噪比是2:1或3:1。

    定量限LOQ

    定量限同樣是指檢測限，然而定量限與LOD是有區(qū)別。類似于LOD，LOQ也可以分成兩個部分，方法定量限（MQL）和儀器定量限（IQL）

    方法定量限可定義為在特定基體中在某一可信度（acertaindegree）內(nèi)對分析物能進(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的最低濃度值。

    儀器定量限可定義為儀器能夠?qū)Ψ治鑫镞M(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的最低濃度值。

    定量限可以用分析物在樣品中的濃度來表示（百分比，ppb）表示。多種慣例采用于LOQ的評估。主要是從其可信性（certainty）考慮(如測試是否基于法規(guī)目的，測試不確定度和可接受準(zhǔn)則等)，最普遍可接受的是將空白加上10倍的重復(fù)標(biāo)準(zhǔn)作為LOQ或3倍的LOD（給出了更大的數(shù)）或高于方法確認(rèn)中使用最低加標(biāo)的50%作為LOQ.為了使數(shù)據(jù)更加的可信性，LOQ可用10的LOD來表示。在某一特定測試領(lǐng)域其它因素可以應(yīng)用，那么機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)將那些現(xiàn)行的因素考慮在內(nèi)。

    定量限是在特定的基體和方法評估的，不同機(jī)構(gòu)之間或在同個機(jī)構(gòu)內(nèi)由于不同設(shè)備、技術(shù)和試劑不同而有差異。

    報告檢出限LOR

    報告檢出限是實(shí)際定量限或高于LOQ.

    LOD-快速參考

    實(shí)例（以下的實(shí)際測量數(shù)不與上述一致，供參考）：

    離子選擇電極測定氨氮含量AMMONIABYIONSELECTIVEELECTRODE(ISE)（quoted：ANALYTICALDETECTIONLIMITGUIDANCE&LaboratoryGuideforDeterminingMethodDetectionLimits，WisconsinDepartmentofNaturalResourcesLaboratoryCertificationProgram，April1996，PUBL-TS-056-96）

    本例子介紹了用認(rèn)可的離子選擇性電極法測定氨氮的方法檢出限MDL.儀器生產(chǎn)商聲稱其儀器的可以檢出0.05mg/L的氨氮含量，使用3個標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為1,5,and10mg/L和空白。將0.05mg/L乘以5倍即0.25mg/L作為最初的“最低濃度值）(當(dāng)然選擇的濃度值可以在0.05~0.25mg/L之間)，結(jié)果列于表中，為計算MDL需要根據(jù)自由度，查表得出t值。對于本例自由度為6，t為3.143（99%概率）。

TABLEI-AMMONIA

Sample    Results%               Recovery

sample1     0.20                    80%

sample2     0.21                    84%

sample3     0.22                    88%

sample4      0.22                   88%

sample5      0.24                   96%

sample6      0.21                   84%

sample7      0.23                   92%

Mean=0.2287.4%

StdDev.=0.013

MDL=(s)(t-value)=0.013x3.143=0.040859

修約為0.041mg/L

LOQ=10x(s)=10x0.013=0.13mg/L

利用以下方面進(jìn)行確認(rèn)：

1.SpikeLevel(MDLx10>Spike):(0.041)(10)=0.41>0.25ug/L[OK,MeetsCriteri]

2.SpikeLevel(MDL<Spike): 0.041<0.25ug/L[OK,Meets Criteria]

3.MDL<Req ---[No Requirement]

4.S/NEstimate(ave/sd):0.22/0.013=16.9 [Checkfor Error]（2.5-10）

5.Recovery:87.4% [Acceptable]

編輯：foodnews